动物医学与科学 | GETVE1蛋白单克隆抗体制备及抗原表位鉴定
动物医学与科学 | GETVE1蛋白单克隆抗体制备及抗原表位鉴定
摘要:为制备针对盖塔病毒(Getah virus,GETV)E1蛋白的单克隆抗体,将GETVEl基因的亲水区片段( 31~ 182位氨基酸区域)构建至pCold-TF原核表达载体中。经表达、纯化,制备TF-El重组蛋白,并以其为免疫原免疫小鼠,借助杂交瘤技术,成功获得1株针对GETVE1蛋白的单克隆抗体。对获得的El单抗进行生物学特性鉴定,结果表明:制备的El蛋白单抗适用于间接免疫荧光和Western blot鉴定。同时,通过截短表达 El蛋白,进一步明确了El蛋白单克隆抗体识别的抗原表位为RPDYQC78,将此抗原表位与GenBank已上传的GETV毒株序列进行比对,发现该序列在GETV毒株中高度保守。综上,GETVE1蛋白单克隆抗体的成功制备,可为GETV的研究提供免疫学工具。